生物制药工艺学

试述制备单克隆抗体的原理是什么?用到的动物细胞工程技术手段有哪几种?单克隆抗体的特点有哪些?

题目

试述制备单克隆抗体的原理是什么?用到的动物细胞工程技术手段有哪几种?单克隆抗体的特点有哪些?

参考答案和解析
正确答案:单克隆抗体的原理:要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。
手段:(1)灌注悬浮培养:连续灌注新的培养基,同时连续排出旧的培养液了,使细胞在一个相对稳定的环境中生长和繁殖,可提高细胞密度10倍以上
(2)贴壁细胞培养:由于大部分动物细胞无细胞壁,进行细胞培养时必须附在固体或半固体表面上培养,在固体载体表面上生长,并扩成一单层,称为单层培养法
(3)固定化细胞培养:采用载体使整个细胞固定化
单克隆抗体的特点:
(1)单克隆抗体是针对单一抗原决定的化学结构完全相同的单一抗体,其特异性强,与其对应抗原的亲和力高度均一
(2)制备时无需将抗原纯化,适于由未纯化的抗原大量制备。
(3)杂种瘤细胞株可冷冻于液氮中长期保存,所以单克隆抗体可以重复稳定的制备,不会因批号的不同而产生差异,只要使用来自同样杂交瘤的单克隆抗体,就能够以同一标准比较各研究室的数据。
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